ExpressionProfile를 분석하기 위한 MolecularBiology실험방법중의 하나.

먼저 특정Cell 또는 조직에서 추출한 mRNA 또는 total RNAGelElectrophoresis을 통하여 크기별로 분획한 다음, 젤상에 전개된 RNA를 membrane filter로 옮기고 방사성동위원소로 표지된 DNA 또는 RNA probe를 이용하여 hybridization을 수행한다. 특이적으로 결합한 probe는 band를 형성하게 되고 이를 필림에 노출시켜 현상함으로써 볼수 있게 된다. Protein의 항원항체반응을 이용한 WesternBlot과 유사하며, DNA-DNA hibridization을 하는 SouthernBlot과도 유사하다

DnaMicroArray는 reverse NorthernBlot이라고 할 수 있다. 즉 한세포나 조직에서 발현된 전체 mRNA로 부터 역전사 반응을 통해 cDNA를 만들고 이를 probe로 이용하는 것이다.

장점

  • 전사체의 길이와 AlternativeSplicing등의 정보도 알 수 있기 때문에 오래된 실험방법임에도 불구하고 Gene ExpressionProfile를 분석하는 보편적인 방법으로 널리 쓰임

  • 특정유전자를 조직별, 발생단계별로 NorthernBlot을 수행하면 그 유전자의 시간적 공간적 발현양상을 알 수 있다.

단점

  • 비교적 다량의 RNA가 필요하므로 초기 발생단계와 같이 다량의 RNA시료확보가 어려운 경우는 적용하기 어렵다.
  • 시간과 노력이 비교적 많이 소요되므로, HighThroughPut 연구에는 적당하지 않다.

최근기술동향

  • 난 잘모르지만 최신의 NorthernBlot에 대해서 아시는 분 적어주세요

NorthernBlot (last edited 2013-08-07 11:42:19 by 61)

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